足球资讯网

COVID-19 呼应——咱们努力于在这场大风行病时代为迷信界供给撑持。领会更多

钻研职员操纵 ImageXpress Pico 体系取得对儿童呼吸体系沾染时代免疫应对的新看法

“ImageXpress Pico 体系使咱们的团队能够或许精确、有用地评价肥大细胞与呼吸道合胞病毒 (RSV) 沾染的人肺成纤维细胞 (HLF) 的连系特征,并更好地领会对呼吸道合胞病毒的炎症反映。”

西雅图儿童病院、西雅图儿童钻研所、华盛顿大学、贝纳罗亚钻研所

首要作者:西雅图儿童钻研所首要钻研者、西雅图儿童病院肺与就寝医学科主治医师 Stephen R. Reeves 博士

ImageXpress Pico 主动化细胞成像阐发体系

挑衅

领会呼吸道合胞病毒沾染的人肺成纤维细胞胞外基质中肥大细胞和通明质酸的连系特征

呼吸道合胞病毒 (RSV) 是天下各地沾染儿童最罕见的病毒之一。病毒的轻度病例仅限于上呼吸道(鼻子和喉咙)发炎;更严重的病例会延长到下呼吸道(支气管和肺),并伴有咳嗽、低烧和食欲不振。

团队

更严重的呼吸道合胞病毒沾染可成长为肺炎、呼吸衰竭和/或灭亡。呼吸道合胞病毒具备高度沾染性,首要影响儿童。可是,成年人和免疫体系较弱的职员也轻易遭到沾染。呼吸道合胞病毒的病症和传布近似于影响高低呼吸道的其余病毒,包含甲型和乙型流感病毒、鼻病毒、腺病毒,和冠状病毒株 COVID-19。

更多地领会这些病毒的潜伏机制,有助于申明潜伏的医治打算。西雅图儿童钻研所、华盛顿大学和贝纳罗亚钻研所的钻研职员动手钻研潜伏呼吸道合胞病毒的一种机制。

Stephen Reeves 博士和他的协作者设想了几个尝试,以肯定呼吸道合胞病毒沾染的人肺成纤维细胞 (HLF) 中肥大细胞与通明质酸 (HA) 之间彼此感化的下流炎症效应。活细胞和牢固细胞荧光成像都须要检测一系列前提,包含通明质酸在胞外基质 (ECM) 中的地位和感化机制、肥大细胞卵白抒发,和通明质酸、肥大细胞与胞外基质之间的份子彼此感化。传统的荧鲜明微须要操纵玻璃盖玻片停止牢固细胞成像,这致使须要停止额定的构造处置并破费额定的处置时候。Reeves 博士和他的团队须要一个进步前辈的体系来以更有用的体例捕获活细胞和牢固构造的高品质图象。

处置打算

高分辩率活细胞和牢固细胞荧光成像和阐发

该钻研团队挑选了 ImageXpress® Pico 主动细胞成像体系,由于其易用、矫捷并且具备壮大的阐发才能。

检测尝试步骤
为赞助团队疾速停止尝试,咱们的现场操纵迷信家和手艺撑持专家为差别的检测供给了现场培训和撑持。这包含开辟检测尝试步骤和静态阐发,以便可同时成像和阐发。

图象收罗
钻研团队先停止了活细胞成像,而后将构造牢固以对胞外基质组分停止染色,而操纵活细胞手艺时不易察看到这些组分。ImageXpress Pico 体系使团队能够或许操纵多孔板停止一切成像,从而大大延长了样本处置和加工时候。作为图象收罗的一局部,在缩小倍率较高的物镜下对较大方针地区停止了拼接,消弭了操纵传统荧鲜明微停止查抄时所需的额定反复,同时还能够取得更高品质的图象。

阐发
Reeves 博士和他的协作者得以对肥大细胞(即 LUVA 细胞)和经呼吸道合胞病毒 (RSV) 沾染的人肺成纤维细胞 (HLF) 的胞外基质之间的彼此感化停止定量阐发。参见以下图象和阐发数据。

LUVA 细胞

ImageXpress Pico 体系还可用于在 48 小时的时候内阐发呼吸道合胞病毒沾染的人肺成纤维细胞对肿瘤特同性糖卵白 (TSG-6) 抒发和肥大细胞(即 LUVA 细胞)黏附的影响。参见以下图象和阐发数据。(注:TSG-6 是一种与炎症相干的卵白,经证实其在呼吸道合胞病毒沾染细胞中抒发上调)。

呼吸道合胞病毒沾染细胞

成果

高品质数据可更快完成迷信冲破

Reeves 博士的团队操纵 ImageXpress Pico 体系初次证实:

  • 在经呼吸道合胞病毒沾染的儿童供体源性人肺成纤维细胞中,通明质酸的分解更多,这致使胞外基质 (ECM) 通明质酸富集
  • 通明质酸富集的胞外基质使肥大细胞的黏附更强并增添了肥大细胞卵白酶的开释,从而致使炎性反映(比方气道缩短、黏液产生、咳嗽)
  • 经呼吸道合胞病毒沾染的人肺成纤维细胞表现出肥大细胞炎性介质抒发降低,和肥大细胞黏附加强

钻研发明标明,通明质酸富集的胞外基质的构成在急性呼吸道病毒沾染时代促进了一个促炎情况。该机制对呼吸道合胞病毒和其余呼吸道病毒的医治干涉干与能够具备深远的意思。

操纵呼吸道合胞病毒沾染人肺成纤维细胞

钻研成果择要:钻研标明,操纵呼吸道合胞病毒沾染人肺成纤维细胞会引诱分解通明质酸的酶(HAS 2 和 3)产生上调,而粉碎通明质酸的酶 (HYAL 2) 产生下调,这会致使通明质酸在胞外基质中的堆集增添,肥大细胞的粘附性更高。另外,经呼吸道合胞病毒沾染的人肺成纤维细胞表现出 TSG-6 抒发降低,从而加强了肥大细胞与胞外基质的连系。与呼吸道合胞病毒引诱的胞外基质连系的肥大细胞可上调肥大细胞卵白酶的抒发,从而促进促炎情况。

参考文献

查找更多:

“ImageXpress Pico 体系正在不时成长以知足咱们不时变更的须要,并开启进一步发明的大门。咱们等候见证接上去的成长!”

Reeves 博士和其余通信作者均为 Jason Debley 博士尝试室的一员。操纵风行病学、临床和份子方式来领会幼儿期哮喘演化,并钻研气道上皮在儿童哮喘中的感化。

西雅图儿童钻研所的的钻研职员钻研了一些影响人体免疫体系的最具挑衅性的儿童疾病。终究方针是操纵免疫学的医治才能设想出新奇的疾病疗法。