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约克大学操纵 Axon 膜片钳仪器来钻研泛毗连卵白通道在癫痫中的感化

约克大学

Georg Zoidl

Paige Whyte-Fagundes

MultiClamp 700B 微电极缩小器

Axon Digidata 1550B 加 HumSilencer 低乐音数据收罗体系

pCLAMP 11 软件套装

挑衅

加拿约莫克大学的 Zoidl 尝试室首要经由过程将斑马鱼幼鱼用作其钻研中的形式生物来钻研心理学和病理学环境下泛毗连卵白通道在神经体系中的感化。

重点是处置文献中对于泛毗连卵白 1 (Panx1) 在癫痫(曩昔十年里一向存在)中的感化抵触概念。

Zoidl 尝试室经由过程操纵基因编辑 Panx1 基因成立功效失活渐变,在斑马鱼中成立了一个癫痫模子,以解答有关 Panx1 通道在癫痫爆发时是不是阐扬差别感化的题目。他们经由过程操纵电心理学东西记实了 6-7 天大的斑马鱼幼鱼体内所选神经元收集癫痫爆发勾当的部分场电位。

该团队在记及时代坚持神经元回路的完全性,并将电理学数据与行动表型尝试成果配对,从而取得有关 Panx1 在癫痫中的感化新看法。与很多其余电心理学家一样,他们也须要处置其电心理学装配呈现线频噪声搅扰的困难。

Axon-2

处置筹算

Axon Digidata 1550A/B HumSilencer 功效可以让该团队消弭 50/60 Hz 线频噪声,从而显现生物旌旗灯号。这个内置可调 HumSilencer 功效可顺应随时候不时变更的线频噪声。在特别环境下可禁用自顺应噪声进修,以便可在全部记及时代保管噪声形式。已保管的噪声形式可在每次新记实竣事前后停止重置。

“咱们的装配可以或许测定来自 6-7 天大的斑马鱼幼鱼体内的场记实内容。咱们已在此操纵方面取得了庞大的胜利;毫无疑难,Axon 装配的活络度在让咱们持续钻研咱们新型转基因斑马鱼系的回路方面起主要感化。”

成果

资深博士钻研生 Paige Whyte-Fagundes 在设立电心理学装配来记实斑马鱼体内电心理学和引领钻研癫痫中 Panx1 的名目方面不可或缺。

团队成员筹算操纵其现有的电心理学装配来钻研各类转基因斑马鱼系间泛毗连卵白通道神经回路的心理学差别。迄今为止,他们已可以或许处置触及到与 Panx1 基因敲除鱼中光安慰视觉处置有关的脑波律动的根基题目。他们还肯定了 Panx1 在其癫痫模子中的神经掩护特征,并发明了一种转变 FDA 核准药物原有效途来削减斑马鱼中癫痫勾当的体例。

在比来的一篇论文中,他们在钻研中就斑马鱼 Panx1a 基因敲除、视觉勾当行动转变和多巴胺能旌旗灯号转导之间的干系停止了报告,该钻研连系了 RNA 测序阐发、及时 PCR、视觉勾当行动阐发和体内电心理学。