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膜片钳电心理学

闻名的 Axon Guide:

电心理学和生物物理尝试室手艺指南

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膜片钳电心理学

膜片钳手艺是一种用于领会离子通道行动的通用型电心理学东西。每一个细胞都抒发离子通道,但经由进程膜片钳手艺停止钻研的最罕见细胞包罗神经细胞、肌纤维、心肌细胞和高抒发单一离子通道的卵母细胞。

为了评价单个离子通道的传导性,微电极与细胞膜会构成高电阻封接,并移除包罗方针离子通道的细胞膜片。或,当微电极密封至细胞膜上时,此细胞膜片会分裂,从而使电极可以或许或许与全数细胞停止电学上的连通。以后施加电压,构成电压钳,并丈量膜电流。电流钳也可用于丈量细胞膜表里电压(称为膜电位)的变更。可以或许经由进程增添化合物阻断或激活通道来转变细胞膜内的电压或电流变更。这些手艺使钻研职员可以或许或许领会离子通道在一般和疾病状况下若何表现,和差别的药物、离子或其余阐发物若何转变这些状况。

操纵 Axon Instruments 的膜片钳使命流程

Axon Instruments® 系列产物(包罗缩小器、数模转换器、软件和焦点组件)为膜片钳尝试钻研供给周全的处理打算。从最小的单通道到最大的微观记实,咱们一流的仪器都有助于停止全系列的膜片钳手艺尝试。加用 Axon pCLAMP 11 软件套装可建立一个简化使命流程,从而停止庞杂高效的尝试,和天生更高品质的数据。领会更多有关电心理学尝试室设置的信息 >

 

膜片钳电心理学

 

  1. 制备溶液 – 制备电极内液和外液;调剂渗入压和 pH 值。

  2. 筹办细胞或脑片 – 筹办培育细胞、分手神经元、脑片或全体植物。

  3. 拉制玻璃微电极 – 筹办记实电极。拉制玻璃毛细管并抛光电极尖端。

  4. 设置贯注体系 – 设置贯注体系和数据收罗软件。确保体系处于屏障状况。

  5. 胁迫细胞 – 操纵操纵器节制电极打仗细胞膜。确保已构成高阻电密封。

  6. 旌旗灯号收罗和缩小 – 缩小旌旗灯号。为了获得最好成果,请确保您操纵精确范例的缩小器停止钻研。

  7. 旌旗灯号数字化 – 随后对摹拟旌旗灯号停止数字化,以便对旌旗灯号停止阐发。

  8. 数据收罗和阐发 – 操纵 pCLAMP 11 软件套装,可编程更长和更庞杂的尝试步骤,以实现更快的数据阐发和切确测定。

 

膜片钳电心理学根本常识的疾速链接:

领会更多有关膜片钳手艺的信息,从单通道到全细胞再到胞外场电位记实。

  • 举措电位

    甚么是举措电位

     举措电位是电压或膜电位在有特定形式的全数细胞膜中疾速降落并随后降落。咱们以神经元和肌细胞来举例,它们便是经由进程举措电位通报旌旗灯号的。

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    细胞通路阐发

     细胞通路阐发

    很多细胞通路都触及离子通道,领会离子通道呼应膜电位变更的功效或是不是存在其余份子,对领会离子通道事实若何到场一般和很是心理进程而言很是主要,这些进程包罗细胞分解与迁徙、疾病状况、和神经元通讯等。

  • cSEVC

    甚么是持续单电极电压钳 (cSEVC)?

    甚么是持续单电极电压钳 (cSEVC)?它是一种电心理膜片钳法,可以使膜电压经由进程细胞并测定电压递升时电流的变更。

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    电流钳缩小器

    电流钳缩小器

    电流钳是一种用于丈量因电流注入而发生的膜电位(电压)的体例。为了丈量膜电位,MultiClamp 700B 和 Axoclamp 900A 均监测沿串连电阻器停止的电流注入所引发的电压降落。电流钳凡是用于将摹拟但逼真的电流波形注入细胞,并监测膜效应。该手艺很是合用于评价举措电位等主要细胞勾当。

  • 数字收罗

    膜片钳电心理学数字收罗

    缩小器收罗的电流或电压旌旗灯号是一种摹拟旌旗灯号,但为了履行高分辩率膜片钳丈量所需的数据阐发,必须将摹拟旌旗灯号转化为数字旌旗灯号。将数模转换器置于缩小器和计较机之间,可实现这一主要使命。旌旗灯号品质极为主要,并且受采样频次影响。最新一代的 Digidata 数模转换器能在 500kHz 下停止采样,且可装备能消弭 50/60Hz 线频乐音的 HumSilencer。

    疾病钻研

    疾病钻研中所用到的离子通道

    离子通道在很多疾病中阐扬感化,包罗高血压;心律变态;胃肠、免疫和神经肌肉疾病、病理痛和癌症。经由进程领会离子通道在某种特定疾病中简直切感化,钻研职员或许可以或许或许找出一种影响离子通道以转变疾病病程的体例。

  • dSEVC

    甚么是不持续单电极电压钳 (dSEVC)?

     在不持续单电极电压钳 (dSEVC) 中,电压记实使命和电流经由进程使命被指定至不异的微电极。

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    电心理学

    电心理学:膜片钳

    电心理学是钻研经由进程某细胞膜的电流或电压变更的钻研范畴。电心理学手艺普遍操纵于各类神经体系迷信和心理学操纵中,从领会某细胞膜中的单个离子通道行动到某细胞中膜电位的全细胞变更,再到体外脑片或体内大脑地区内场电位的较大规模变更。

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  • 离子通道

    离子通道

    离子通道是一组逾越细胞脂质双层并构成孔道的卵白质。每一个通道仅对特定离子具有通透性(比方:钾、钠、钙、氯)。经由进程操纵超活络缩小器、高品质数据收罗体系和用于评价成果的壮大软件停止间接及时测定,以操纵膜片钳评价与离子通道勾当有关的膜中的电流或电压。

    膜片钳

    膜片钳电心理学手艺

    膜片钳手艺触及与细胞膜构成安稳千兆欧姆 (GΩ) 封接的玻璃微电极。玻璃微电极中含有一根浸入电解溶液中的导线,用于传导离子。全细胞手艺触及经由进程暖和抽吸来粉碎膜片以供给低阻电旌旗灯号接入,从而节制跨膜电压。或,钻研者可将膜片与细胞分手并操纵膜内向外或膜内向外膜片钳手艺来评价经由进程单通道的电流。

  • 串连电阻弥补

    操纵全细胞记实体例停止串连电阻弥补

    串连电阻是操纵全细胞记实体例测得的缩小器和细胞外部之间一切电阻的和。按照欧姆定律,该电阻越大,号令电压和丈量值之间的差值就越大。这使得现实电压或电流丈量值呈现偏差,可以或许会致使察看成果不精确。为了降服这个错误谬误,Molecular Devices 缩小器操纵内置电路来弥补因串连电阻下的电压或电流降落引发的偏差,以增添记实带宽。

    单通道记实

    膜片钳单通道记实手艺

    膜片钳手艺触及与细胞膜构成安稳千兆欧姆封接的玻璃微电极。玻璃微电极中含有一根浸入电解溶液中的导线,用于传导离子。要测订单离子通道,则在构成千兆欧姆封接后将膜的“膜片”与细胞分手。若是单个离子通道被包罗在膜片内,则可丈量电流。Axopatch 200B 具有极低乐音特征,很是合用于此操纵,可大幅度加强传导性极小的离子通道的旌旗灯号。

  • Axon 指南

    Axon 指南

    电心理学和生物物理尝试室手艺指南。该指南的方针是为电心理学家供给信息和数据资本。它涵盖了普遍的主题,规模从生物电的生物学根本和根基尝试室设置的描写到乐音和数据阐发机制的会商。

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    电压钳缩小器

    电压钳缩小器

    在一项操纵电压钳体例的尝试中,钻研者节制细胞内的膜电压,并丈量为了坚持该电压而须要的跨膜电流。该电压节制称为号令电压。为了坚持该号令电压,必须向缩小器注入电流。注入的电流将与经由进程开放离子通道流出的电流相称,但标的目的相反,从而使缩小器可以或许或许丈量流过开放膜连系离子通道的电流总量。

  • 全细胞记实

    全细胞记实膜片钳手艺

    全细胞膜片钳手艺触及与细胞膜构成安稳千兆欧 (GΩ) 封接的玻璃微电极。该微电极含有一根浸入电解溶液中的导线,用于传导离子。随后经由进程暖和抽吸来粉碎膜片,以便玻璃微电极供给通向全细胞的低电阻通路,从而让钻研者可以或许或许节制跨膜电压,并让钻研者可以或许或许评价经由进程膜连系离子通道的电流总量。

电心理学的资本

  • 用户指南

    用户指南

    The Axon™ Guide

    Axon™ 指南

    Axon 指南是一个对电心理学和生物物理尝试室手艺的指南

    Download User Guide

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  • 产物手册

    彩页

    Axon Instruments® 系列产物(包罗缩小器、数模转换器、软件和焦点组件)为膜片钳尝试钻研供给周全的处理打算。

  • 信息图表

    信息图表

    该指南供给对膜片钳装配的信息。它是一种主要的电心理学手艺,操纵规模普遍。

视频和收集钻研会

Axon pCLAMP 11 软件

操纵 Axon pCLAMP 11 软件中的新批量阐发功效来节流您的数据阐发时候

操纵 Axon pCLAMP 软件计较衰减时候常数并停止曲线拟合

若何操纵 Axon pCLAMP 软件来组合轨迹、计较回升或衰减时候常数并停止曲线拟合

经由进程电心理学钻研加快有关领受和传输的机理钻研

经由进程电心理学钻研加快有关领受和传输的机理钻研

用于同步光形式的光遗传学考量的硬件挑选

用于同步光形式的光遗传学考量的更新版本和硬件挑选

淀粉样卵白对爪蟾卵母细胞模子中 hSlo1.1(一个 BK 通道)的影响

钻研淀粉样卵白对爪蟾卵母细胞模子中 hSlo1.1(BK 通道)的影响

用于单份子生物物理学和生物纳米手艺的纳米孔电子东西

用于单份子生物物理学和生物纳米手艺的纳米孔电子东西

电心理学的相干产物和办事