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酶联免疫吸附尝试 (ELISA)

甚么是 ELISA?

酶联免疫吸附尝试 (ELISA) 是一种用来定量检测样本中某种抗原的方式。抗原是一种会致使植物免疫体系倡议进攻反映的毒素或其余外来物资,比方流感病毒或情况净化物。潜伏抗原的规模很广,是以在很多钻研和检测范畴中操纵 ELISA 来检测和定量各类样本范例中的抗原。操纵 ELISA 阐发细胞裂解物、血样、食物等特定物资。

ELISA 有四种首要范例:直接法、直接法、合作法和双抗夹心法。每种范例的描写以下,并用图说了然阐发物和抗体是若何连系和操纵的。

  • 直接法 ELISA

    直接法 ELISA

    在直接 ELISA 法中,抗原包被在微孔板孔底,而后再连系对该抗原有特同性的抗体,抗体上偶联了可停止检测的酶或其余份子。

    直接法 ELISA

    直接法 ELISA

    在直接 ELISA 法中,抗原包被在微孔板孔底,而后插手对该抗原有特同性的抗体。随后插手酶或其余检测份子的二抗连系一抗。

  • 合作法 ELISA

    在合作法 ELISA 中,参照抗原包被在微孔板孔底。将样品和抗体插手孔中,若是样品中存在抗原,则它会与参照抗原合作连系抗体。洗掉不连系的物资。样品中的抗原越多,终究孔底连系的参照抗原的抗体就越少,旌旗灯号就越弱。

    双抗夹心法 ELISA

    双抗夹心法 ELISA

    对双抗夹心法 ELISA,操纵对靶标抗原上的两个差别表位具备特同性的两种抗体。捕获抗体连系到微孔板孔底,并连系该抗原的一个表位。检测抗体连系该抗原的差别表位,并偶联可停止检测的酶。(若是检测抗体未偶联,则须要酶偶联的检测二抗)。

双抗夹心法 ELISA 检测的步骤

大大都夹心 ELISA 都在微孔板中停止,此中微孔板孔的底部用作抗体与其余试剂连系的固体外表。微孔板洗板机用于洗去孔中的非特同性物资,而吸光度 ELISA 微孔板读板机则检测存在靶抗原时发生的色彩变更。并且,读板机软件也可用于绘制规范曲线并计较成果。

下图显现了规范双抗夹心法 ELISA 检测的任务流程:

 

第 1 步: 捕获抗体与 ELISA 板孔连系

第 2 步: 将样品增添到孔中 – 样品中的抗原与捕获抗体连系。

第 3 步: 洗濯微孔板 – 洗去未连系的物资,仅留下感乐趣抗原

第 4 步: 增添检测抗体 – 酶偶联检测抗体与感乐趣抗原上的第二个位点连系

第 5 步: 洗濯微孔板 – 洗去未连系的抗体,仅留下对感乐趣靶标具备特同性的抗体

第 6 步: 增添底物 – 底物经由进程检测抗体上的酶发生转化,从而发生色彩变更

第 7 步: 读取板 – 微孔板读板机检测有色反映产物并输入光密度 (OD) 值

第 8 步: 计较成果 – 计较并阐发每份样品中的抗原量

检查 ELISA 尝试步骤

 

ELISA 检测与操纵

 

酶联免疫吸附尝试是很多钻研和生物手艺尝试室中经常操纵的一种阐发手艺。以下是与 ELISA 检测和操纵相干的一系列操纵申明、钻研和手艺。

 

  • 化学发光 VEGF ELISA

    化学发光 VEGF ELISA

    血管内皮成长因子 (VEGFs) 是排泄多肽的家属,与哺乳植物血管发育和一般血管成长的疾病进程有关。

    阅读操纵申明: 操纵 SpectraMax L 微孔板发光计停止化学发光 VEGF ELISA

    测定大麻中的黄曲霉毒素

    大麻

    在此,咱们展现了若何将 AgraQuant Total Aflatoxin 4/40 ELISA 试剂盒与 SpectraMax® ABS Plus 微孔板读板机和 SpectraMax® iD5 多功效微孔板读板机一起用于检测一种最罕见的大麻产物(花)中的黄曲霉毒素 B1、B2、G1 和 G2 程度。

    阅读操纵申明: 操纵 ELISA 方式测定大麻中的黄曲霉毒素总量

  • 操纵 ELISA 试剂盒更快地取得成果

    典范的 ELISA 尝试步骤较为耗时,有多个孵育和洗濯步骤。CatchPoint SimpleStep ELISA 试剂盒为用户供给了一个 90 分钟的 ELISA 任务流程,与传统 ELISA 比拟,时候延长了约莫三分之二。

    阅读操纵申明: 操纵 CatchPoint SimpleStep ELISA 试剂盒更快地取得 ELISA 成果

    定量啤酒中的谷卵白

    操纵 ELISA 对谷卵白定量

    检测 6 种市售啤酒中的麦胶卵白程度,以操纵 RIDASCREEN 麦胶卵白合作性 ELISA 测定谷卵白程度。

    阅读操纵申明: 操纵一种经美国酿造化学家协会 (ASBC) 核准的 ELISA 方式对啤酒中的谷卵白停止定量

  • ELISA 汗青

    ELISA 汗青

    摸索 ELISA 的发源和这些年来该方式是若何成长演化的,从而增进今世某些最主要的迷信冲破。

    阅读博客: ELISA 从建立之初到 COVID-19 钻研的汗青

    若何设置 ELISA 起点法尝试步骤

    ELISA 起点尝试步骤

    本视频就若何在 SoftMax Pro 软件中设置 ELISA 起点尝试打算供给了慢慢申明。操纵尝试打算中的模板功效能够或许实现疾速、主动化数据阐发。曲线拟合可供给切确的成果可视化。

    检查按需收集钻研会  

  • 若何设置酶联免疫吸附检测 (ELISA) 并履行根本阐发

     ELISA 检测并履行根本阐发

    四局部收集钻研会系列的第 1 局部先容了 SoftMax® Pro 7.1.1 GxP 收罗和阐发软件,并展现了疾速轻松运转您的检测并取得成果有何等轻易。

    冗长的先容以后,您将旁观若何操纵 SoftMax Pro GxP 软件和 SpectraMax® iD3 多功效微孔板读板机并经由进程 ELISA 检测示例来设置并取得数据的现场演示。咱们将在切磋阐发的根基因素之前诠释取得数据所必需的软件设置。咱们将操纵一个实在的数据集来先容数据简化,从而建立模板并天生规范曲线。

    检查按需收集钻研会  

    用 ELISA 试剂盒停止三聚氰胺检测

    用 ELISA 试剂盒停止三聚氰胺检测

    无机三聚氰胺被用于制作很多产物,包罗塑料、阻燃剂、色素和肥料。比来报告了存在向植物饲料和供人食用的食物中增添三聚氰胺以增添表观卵白含量的做法。由于三聚氰胺可致使严重疾病或灭亡,人们愈来愈存眷可用于检测各类食物产物中是不是存在三聚氰胺净化的方式简直定。

    阅读操纵申明:

  • 卵白定量

    细胞因子 Interleukin-22

    操纵双抗夹心法 ELISA 比拟 EMax Plus 微孔板读板机和 EMax 起点读板机的机能,以对细胞因子 Interleukin-22(小鼠/大鼠 IL-22)的程度停止定量。

    阅读操纵申明: 操纵 EMax Plus 微孔板读板机停止卵白定量

    定量白细胞介素-8

    领会若何在 SpectraMax® ABS Plus 微孔板读板机(酶标仪)上操纵方便的预设方式停止人 IL-8 SimpleStep ELISA 检测。

    阅读操纵申明: 在 SpectraMax ABS Plus 微孔板读板机上操纵 SimpleStep ELISA 试剂盒定量白细胞介素-8 的浓度

ELISA 尝试的任务流程

一个典范夹心 ELISA 尝试步骤的任务流程触及多个试剂增添、孵育和洗濯步骤。在此,咱们夸大了停止 ELISA 检测的每步和所需的仪器和东西,包罗微孔板洗板机、吸光度 ELISA 读板机和软件。

 

任务流程:ELISA 检测尝试步骤
 
抗体连系孔

捕获抗体连系孔

起首,捕获抗体连系微孔板孔底。

微孔板孔

ELISA 平板

大大都 ELISA 在 96 或 384 孔微孔板中停止,96 孔板最为罕见,偶然也称为酶标板。微孔板孔底作为抗体和其余试剂附着的固体外表。微孔板凡是包罗在 ELISA 试剂盒中。

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领会更多信息  
光谱
挪动光谱
增添样品
增添挪动样品

增添样品

将样品增添到孔中,样品中的抗原连系捕获抗体。

02
洗濯微孔板
洗濯挪动微孔板

洗濯微孔板

洗掉不连系的物资,仅留下方针抗原,并最大程度下降高背景旌旗灯号的能够性。

ELISA 读板机和洗板机

ELISA 读板机和洗板机

操纵带有 SoftMax Pro 数据收罗软件的 EMax Plus 微孔板读板机和 MultiWash+ 微孔板洗板机可为您的 ELISA 任务流程供给全套处置打算。

检查产物
03

主动化您的任务流程

操纵咱们的 AquaMax® 洗板机和 StakMax® 微孔板处置体系节流时候和资本

领会若何操纵  
光谱
挪动光谱
增添检测抗体
增添挪动检测抗体

增添检测抗体

酶偶联的检测抗体连系方针抗原上的第二个位点,供给了检测抗原的方式。

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洗濯微孔板
洗濯挪动微孔板

洗濯微孔板

洗掉不连系的抗体,仅留下对方针靶标具备特同性的抗体,并再次最大程度下降背景旌旗灯号的能够性。

AquaMax 微孔洗板机

ELISA 洗板机

AquaMax 微孔板洗板机:在一切孔中同时停止 96 和 384 孔吸液和分液,从而实现高精度检测和更快的微孔板处置,无需停止板孔设置或象限处置。

检查产物
05
增添底物
增添挪动底物

增添底物

检测抗体上的酶会转化底物,从而发生色彩变更,此中强度与存在的抗原数目成比例。

按照所用的酶和底物,读数能够是荧光读数,也能够是发光读数。

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读取微孔板
读取挪动微孔板

读板

微孔板读板机可检测黑色反映产物并输入光密度 (OD) 值,这个值标明每一个孔的内容物接收了几多光。

ELISA 读板机道理

ELISA 读板机

SpectraMax ABS Plus Absorbance ELISA 微孔板读板机等 ELISA 读板机可检测存在靶标抗原时发生的色彩变更。经由进程丈量孔内物资接收了几多经由进程微孔板孔的光便可实现。存在的抗原越多,吸光度值越高。

检查产物
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ELISA 读板机软件

ELISA 读板机软件

咱们的 SoftMax Pro 数据阐发软件等 ELISA 读板机软件用于绘制规范曲线,并按照微孔板读板机供给的吸光度值来计较成果。

按照规范曲线切确计较每份样品中的抗原量。预设置装备摆设的尝试步骤可主动计较成果,从而节流时候。

检查产物
计较成果
计较挪动成果

计较成果

计较每份样品中的抗原量,并且可比拟差别的样本,比方操纵差别处置前提的细胞。

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ELISA 资本

视频和收集钻研会

从 ELISA 到 AlphaScreen,操纵多功效读板机来扩大检测操纵

ELISA 起点尝试步骤

若何设置 ELISA 起点法尝试步骤

若何操纵 SoftMax Pro 软件设置 ELISA 检测并履行根本阐发

SpectraMax ABS 和 ABS Plus 光接收微孔读板机(酶标仪)

SpectraMax ABS 和 ABS Plus 光接收微孔读板机(酶标仪)

SoftMax Pro 7 软件

SoftMax Pro 7 软件

AquaMax 微孔洗板机

AquaMax 微孔洗板机

操纵 EMax plus 微孔读板机(酶标仪)停止 ELISA 任务流程

操纵 EMax plus 微孔读板机(酶标仪)和 MultiWash+ 微孔板洗板机停止的 ELISA 任务流程

相干产物和办事