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癌症钻研处置打算

用于领会癌症钻研中的细胞通路和细胞彼此感化的生物阐发处置打算

对如细胞球、类器官和器官芯片生物学等细胞模子停止 3D 成像和阐发,以挑选癌症医治物

癌症触及细胞的转变,包罗使细胞离开一般限定成长和割裂,从而侵袭和粉碎相邻构造,并终究转移至身材远端部位。癌症钻研职员须要更好的钻研东西,使他们能够或许或许或许更轻易地钻研庞杂的、待摸索的癌细胞与其情况之间的彼此感化,并肯定癌症医治干涉干与点。

操纵具备生物相干性的 3D 细胞模子,如可摹拟肿瘤或器官体内情况的细胞球、类器官和器官芯片体系,领会咱们的高内在成像体系和阐发软件处置打算,从而增进癌症钻研。

将前线腺癌细胞莳植在细胞孔板中,用 100nM 抗癌药物 paclitaxel 停止处置,并对细胞停止时候序列成像。用 caspase-3/7(绿色,细胞凋亡标记物)和 ethidium homodimer-1(白色,细胞坏死标记物)对细胞停止染色,每 30 分钟成像一次,延续 72 小时。

 

癌细胞球 3D 成像手艺的上风

癌细胞球远比规范 2D 细胞培育更有效地摹拟肿瘤行动。此类 3D 细胞球模子已胜操纵于挑选情况以判定潜伏癌症医治。这些培育体系可用于多参数阐发,从而定量差别生物景象、加快癌症药物开辟。

焦点上风包罗:

  • 3D 高内在成像的开辟标记着向更相干和更切确的检测迈进了一大步
  • 3D 培育体系可敏捷天生均一的人癌细胞球,其能够或许或许高通量情势操纵以加快癌症药物开辟
  • 操纵癌细胞共聚焦 3D 图象阐发的钻研已实现了很多生物景象的多参数特点判定

 

 

用于在高通量挑选情况中阐发 3D 癌细胞球的任务流程

细胞球可在 96 或 384 孔板中培育、操纵化合物处置并用可揭露细胞任务历程和通路的染料停止染色。在某些情况下,无需洗濯便可对细胞球停止成像;若有须要也可对其停止牢固。

操纵各类成像、细胞挑选和微孔板读板机体系简化您的肿瘤学任务流程。

 

 

任务流程说了然用于阐发细胞球的简化流程,并夸大了可赞助您简化钻研并前进通量的体系。

  1. 培育细胞球 – 可间接操纵一块超低黏附 (ULA) 圆底板,或其余尝试室培育耗材间接培育癌症细胞,以培育惯例形状的细胞球。其余尝试室培育耗材让人能够或许或许或许在单个孔中培育多个细胞球。

  2. 操纵化合物处置 – 细胞球组成后,将所需浓度的化合物增添到孔中,随后孵育一天至几天,详细取决于所钻研的机制。

  3. 标记物染色 – 化合物处置实现后,间接向培育基增添染料。能够或许或许操纵无需洗濯的染色剂,以避免搅扰细胞球,但在须要时,能够或许或许操纵主动化手艺谨慎洗濯细胞球。

  4. 收罗细胞球图象 – 可操纵特地的成像装备零丁或以 Z 仓库情势(在差别深度收罗多张图象)捕获细胞球球体内的图象。

  5. 阐发癌症细胞 – 操纵细胞成像阐发软件运转细胞图象定量阐发,以监测差别标记物的抒发并定量生物学读数。

 

 


 

 

经由历程对肿瘤细胞球的高通量共聚焦成像挑选癌症医治打算

 

最近几年来,在开辟肿瘤细胞体外聚个人以用作体内构造情况的模子方面已获得了较着停顿。当接种至超低黏附圆底微孔板的一个孔中时,这些聚个人会组成一个团圆的细胞球。细胞球被以为可比惯例二维 (2D) 细胞培育更有效地摹拟肿瘤行动,因为它们与肿瘤很是类似,同时包罗外表裸露和深埋的细胞、增殖和非增殖细胞,并包罗具备一个充实氧化的细胞外层和缺氧中间。此类 3D 细胞球模子已胜操纵于挑选情况以判定潜伏癌症医治。

当开辟靠得住的细胞球检测面对多少挑衅时,操纵主动高通量、高内在成像就成了体内相干性更佳的候选化疗药物检测的一个主要步骤。

  • 以 20x 缩小倍率在一个视线中捕获全数细胞球
  • 以 96 或 384 孔情势挑选具备生物相干性的 3D 细胞球
  • 操纵共聚焦成像切确检测细胞反映
  • 经由历程仅保管 Z 立体图象的 2D 重构来节流存储空间

 

领会更多信息

图 1. 敏捷挑选微孔板中的 3D 细胞球

图 1

(1a) 96 孔板中经化合物处置且操纵 10x Plan Fluor 物镜成像的 HCT116 细胞球的缩略图拼接。经 Hoechst 染色的胞核(蓝色)与 CellEvent Caspase 3/7 凋亡标记物(绿色)叠加。

(1b) 第 4 栏为未经处置的对照物,而 (1c) 第 5-7 栏中的 Caspase 3/7 反映较着,此中 A 排中的紫杉醇以 1:3 的比例从 1 µM 起头停止梯度浓缩(3 次反复)。

(1d, 1e) 将 11 个 Z 立体归并为一张 2D 最大投影图象,并操纵便利的自界说模块对其停止阐发。显现的是展现低度和高度凋亡的原始图象及其响应的朋分标记(品蓝 = 胞核,粉色 = 凋亡细胞)。

(1f) 经由历程在与未经处置的细胞球对照的情况下将凋亡数目均一化并绘制于图表上,可察看到紫杉醇(绿色线)引诱凋亡所需浓度远低于丝裂霉素 C 或依靠泊苷。

规范化至对照程度的凋亡细胞

图 2

 

 


 

 

操纵和检测

Molecular Devices 是细胞成像的行业抢先者,供给了各类百般的东西来撑持性命迷信钻研、药物发明和高通量挑选。咱们的高内在成像体系能够或许或许助力您在生物阐发癌症钻研任务中获得胜利。咱们还供给多种设置装备摆设的多功效读板机,和一系列易于操纵的微阵列扫描仪。

领会更多对于咱们的手艺若何助力您的癌症医治钻研的信息。

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